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細胞活性是指細胞在特定條件下能夠維持正常生命活動的能力,包括細胞的代謝、生長、分裂和對刺激的反應(yīng)。在生物研究和醫(yī)學領(lǐng)域,細胞活性的檢測對于評估細胞健康狀態(tài)、藥物效果、細胞毒性以及細胞增殖能力等方面至關(guān)重要。
1、細胞代謝檢測:
l MTT法:通過活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶還原MTT生成不溶性的甲臜,來反映細胞活性。
l CCK-8法:基于WST-8的比色法,檢測細胞增殖和毒性,生成的甲臜是水溶性的,簡化了操作步驟。
l ATP生物發(fā)光法:利用細胞內(nèi)ATP含量與活細胞數(shù)呈線性關(guān)系,通過熒光素酶催化反應(yīng)檢測ATP,快速且靈敏。
l Alamar Blue法:使用Alamar Blue試劑,通過檢測氧化還原狀態(tài)反映細胞代謝活性。
2、細胞計數(shù)檢測:
臺盼藍染色法:利用死細胞對臺盼藍的吸收性,通過顯微鏡計數(shù)區(qū)分活細胞和死細胞。
AO/PI染色法:吖啶橙(AO)和碘化丙啶(PI)的組合,用于區(qū)分活細胞、凋亡細胞和死細胞。
3、克?。洌┬纬稍囼灒?/span>
通過計算單個細胞形成克隆的能力來評估細胞增殖潛力,適用于抗腫瘤藥物敏感性試驗等。該方法較為繁瑣,耗時較長,不適合大規(guī)模樣本同時監(jiān)測。
4、DNA合成檢測:
使用EdU等胸腺嘧啶核苷類似物代替T滲入復(fù)制中的DNA,通過特異性熒光染料反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性,反映細胞增殖情況。
這些方法各有優(yōu)缺點,選擇合適的檢測方法取決于實驗?zāi)康摹⑺铏z測的細胞類型、實驗條件以及設(shè)備的可用性。在細胞活性檢測中,確保結(jié)果的準確性和重復(fù)性至關(guān)重要,因此在實驗設(shè)計和操作過程中需要嚴格控制變量,遵循標準操作程序。